高良姜藥材中4種有效成分的含量測定范文

　　高良姜為姜科山姜屬植物高良姜alpinia officinarum hance的干燥根莖，其性熱味辛，歸脾、胃經,具溫胃散寒、消食止痛的功效，用于脘腹冷痛、胃寒嘔吐、噯氣吞酸等。以下是高良姜藥材中4種有效成分的含量測定。

　　高良姜黃酮和庚烷均具有調節鈣離子釋放、抗氧化應激、抗炎、調節免疫、抗病原微生物、抑制平滑肌刺激收縮、鎮痛止嘔等藥理作用[2～5]。高良姜含有十多種黃酮類成分[6]和十多種二苯基庚烷類物質[7]，其中高良姜素、山柰素?4′?甲醚、5?羥基?7?(4?羥基?3?甲氧苯基)?1?苯?3?庚酮 (dpha)、5?羥基?1,7?雙苯?3?庚酮 (dphc)含量比較高，因此本文選擇這4個成分作為監控指標，采用hplc法同時測定不同批號和來源的高良姜藥材中的以上的2種黃酮類成分和2種庚烷類成分的含量，為全面準確控制藥材質量提供了可行的依據。

　　1、儀器、試劑與材料

　　waters2695/2996高效液相色譜儀，empower工作站; bp210d型電子分析天平(德國sartorius公司);高良姜素對照品、山柰素?4′?甲醚對照品、dpha、dphc對照品均為自制，經uv、nmr、ms確定化合物結構，以hplc法按面積歸一化法計，質量分數>98.0%;乙腈(色譜純);超純水;高良姜藥材為各地收集的市售產品，經廣東藥學院中藥鑒定教研室王鳳云老師鑒定均為姜科植物高良姜的根莖。

　　2、方法與結果

　　2.1 溶液的制備

　　2.1.1 對照品溶液的制備

　　分別精密稱取高良姜素、山柰素?4′?甲醚、dpha、dphb、dphc對照品，加甲醇制成每1 ml含1.068、0.414、1.243、0.248、0.989 mg的對照品儲備液。分別精密量取上述對照品儲備液各1 ml，置20 ml容量瓶中，加甲醇稀釋并定容至刻度，搖勻，制成對照品溶液。

　　2.1.2 供試品溶液的制備

　　取不同批號的高良姜藥材細粉約0.2 g，精密稱定，加甲醇約40 ml回流提取2 h，放冷，過濾，濾液加甲醇定容至50 ml。搖勻，用0.45 μm微孔濾膜濾過，取續濾液，作為供試品溶液。

　　2.2 色譜條件

　　廣東藥學院學報，2017，24(5)第5期 陳平,等.高良姜藥材中4種有效成分的含量測定　　色譜柱：diamonsil tmc18色譜柱(200 mm4.6 mm，5 μm);流動相：乙腈(a)?0.2%磷酸水(b)，梯度洗脫[0～30 min，a?b(39∶42);30～35 min，a?b(45∶55)]，檢測波長：220 nm;流速：1.0 ml/min;柱溫：30 ℃，進樣量：20 μl。

　　2. 3 系統適應性試驗

　　分別精密吸取對照品溶液及供試品溶液各20 μl注入液相色譜儀，計算理論板數及分離度，結果見表1、圖1、圖2。

　　2.4 線性關系的考察

　　分別精密吸取對照品溶液5、10、15、20、25 μl注入液相色譜儀，按“2.2”色譜條件測定，以峰面積積分值為縱坐標，對照品進樣量為橫坐標繪制標準曲線，結果見表1。表1 系統適應性試驗結果

　　成分線性方程r線性范圍/μg高良姜素y=4.0106 x+5.11040.999 80.267 0～1.328 0山柰素?4′?甲醚y=4.0106x+2.51040.999 90.103 4～0.517 0dphay=2.0106x+2.01040.999 90.310 8～1.554 0dphcy=8.2105x+4.71030.999 40.247 3～1.236 0

　　2.5 重復性試驗

　　取高良姜藥材細粉(批號20170315)約0.2 g，精密稱定，共6份，按“2.1.2”項下的方法制備供試品溶液后，按“2.2”色譜條件下測定各組分的含量，結果高良姜素、山柰素?4′?甲醚、dpha、dphc的rsd值(n=6)分別為0.92%、1.60%、0.45%、1.8%，表明方法重現性良好。

　　2.6 穩定性試驗

　　取供試品溶液(批號20170315)1份，分別間隔4、12、24、36、48 h進樣，連續測定2 d，計算含量，結果高良姜素、山柰素?4′?甲醚、dpha、dphc的rsd值(n=6)分別為0.71%、1.51%、1.7%、1.9%，表明供試品溶液在48 h內測定結果穩定。